jueves, 11 de noviembre de 2010

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PRESENTACION DE BACILLUS CLAUSSI

A continuacion esta en enlace con una presentacion del tema:

http://rapidshare.com/files/430259614/bacillus_claussi.pptx

Marco teorico 2

RESUMEN
Se hace una revisión sobre el empleo de probióticos a base de cepas de Bacillus
sp. y sus endosporas. Se define el concepto de probiótico y su evolución a partir
de los trabajos de Metchnikoff (1908). Se señalan las características morfológicas
y bioquímicas de los cultivos de Bacillus sp y sus endosporas y se destacan los
principales efectos de estos sobre indicadores inmunológicos, fisiológicos y
productivos en aves. Finalmente, se muestran los principales resultados del
empleo, como probiótico, de estos cultivos en la avicultura.
Palabras claves: Bacillus sp, endosporas, probióticos, aves.
INTRODUCCIÓN
Debido a los métodos de manejo intensivos actuales, los animales de granja,
fundamentalmente las aves, son muy susceptibles a desbalances bacterianos
entéricos que llevan a una insuficiente conversión de los alimentos y a una
disminución en la respuesta zootécnica. Para atenuar estas dificultades, las dietas
son suplementadas con antibióticos, los cuales han mostrado ser efectivos en la
disminución de los trastornos diarreicos y en la promoción del crecimiento animal
(Armstrong, 1986; Parker y Armstrong, 1987), sin embargo, el uso indiscriminado
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de los mismos ha llevado a la aparición de cepas patógenas resistentes. Hoy
preocupa el riesgo potencial, por el uso de los antibióticos en los animales
productores de alimento y su eventual contribución a que favorecen el desarrollo
de enteropatógenos en el tracto intestinal, que pueden conducir a serias
implicaciones médicas (Levis, 1998; Christina y Surawicz 2003 y Günter, 2003).
Como una solución a la necesaria reducción del uso de los antibióticos en el
alimento animal para promover el crecimiento, ha despertado renovado interés la
incorporación de cultivos de bacterias probióticas como aditivos promotores de la
respuesta productiva en animales (Nisbet, 2002; Philippe, 2003 y La Ragione et
al., 2004).
En tal sentido algunos cultivos del género Bacillus y sus endosporas, están
recibiendo marcada atención por el efecto probiótico que brindan sobre el balance
de la microflora intestinal, la mejora en la digestión y la absorción de los
alimentos, la mayor eficacia en la conversión alimenticia y los mejores
rendimientos productivos, principalmente, en aves (Inooka at al 1986; Guillot
2000 y Spinosa et al 2000; La Ragione RM et at., 2001 y Jadamus et al, 2001 y
Duc le H et al 2003).
El objetivo del presente trabajo es hacer una revisión sobre el empleo de
probióticos a base de cepas de Bacillus sp y sus endosporas como mejoradores
del sistema inmunológico, la fisiología digestiva y la respuesta productiva en las
aves.



Microbiología del tracto intestinal de las aves
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Normalmente, las bacterias que habitan en el tracto digestivo no solo son
beneficiosas, sino también esenciales. En las aves, las bacterias crecen
activamente en el buche, intestinos y ciegos. Entre las aves silvestres, los recién
nacidos obtienen sus primeras bacterias de la boca, buche o excremento de la
madre. Por consiguiente, una población deseable, equilibrada, o beneficiosa de
bacterias se establece rápidamente en el ave joven. Los polluelos que nacen en
plantas incubadoras comerciales no tienen esta oportunidad. Estos problemas se
puede resolver proporcionando cultivos vivos de bacterias beneficiosas
(probióticos) al momento de la eclosión. Una población bacteriana beneficiosa
inhibe bacterias potencialmente patogénicas, estimula el sistema inmunológico,
produce nutrientes que ayudan a nutrir las células que recubren el tracto
digestivo, reduce la producción de amoniaco y las cantidades tóxicas de aminas
biogénicas (Garlich, 1999).
Moreno (2003), plantea que son muchas las bacterias y las levaduras que se
pueden usar de forma beneficiosa para mantener una flora digestiva sana y en
equilibrio. Los microorganismos mas usados son Lactobacillus sp., Sreptococcus
faeccium, Bacillus subtilis, Bacillus cereus, Bacillus licheniformis, Bacillus
stearothermophyllus y Saccharomyces cerevisiae.
Los Lactobacillus, que crecen rápidamente en el intestino, son quizás los más
conocidos por los avicultores, se trata de bacterias que pueden transformar la
lactosa en ácido láctico. Este aumento de ácido láctico hace disminuir el pH
intestinal a unos niveles tan bajos que la supervivencia de microorganismos como
la E.coli, Salmonellas entre otros, se hace muy difícil.Las levaduras también
forman parte de los probióticos, son utilizados por su poder fermentativo y por su
riqueza en vitaminas del grupo B y enzimas hidrolíticas que ayudan al proceso de
digestión.(Moreno,2003).
Walter y Henry (1988) plantearon que Bacillus, podían ser usados como
probóticos pero de forma repetitiva en el alimento para prevenir los desórdenes
digestivos y/o mejorar el desarrollo zootécnico.
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Características microbiológicas del Bacillus sp.
Las bacterias del género Bacillus microbiológicamente son consideradas como
Gram positivas en forma de bastoncillo, agrupadas en cadenas, mótiles y
flagelación perítrica, formadoras de endosporas, anaerobias estrictas o
facultativas, no son adherentes, y son productoras de sustancias antimicrobianas
y enzimas hidrolasas. Entre las especies de mayor importancia como probióticos
pertenecientes a este género están B. cereus, B. licheniformis, B. subtilis y B.
natto.(Jawets,1996).
La producción de endosporas es una característica típica de todas las bacterias
de los géneros Bacillus y Clostridium. Estas son pequeñas estructuras ovoides o
esféricas, en las que pueden transformarse estas bacterias y constituyen formas
celulares muy resistentes al calor y al medio adverso. Su síntesis se produce
frente a condiciones de limitación de nutrientes, agua y oxígeno y constituye un
sistema de protección frente a las condiciones ambientales adversas. En su
composición química entran el ácido dipicolínico (ADP) y los iones Calcio, que
asociados al córtex, forman el dipicolinato de Calcio, responsable de la resistencia
al calor( Stanier,1996).
La estructura de las endosporas es compleja y posee varias capas que, del
exterior al interior, pueden nombrarse como: exosporio (cubierta fina y muy
delicada), cutícula (con una o varias capas de material similar al de la pared
celular) y córtex (compuesta por varios anillos concéntricos, constituido por
glucopéptidos y contenedor de las estructuras normales de la célula.(Stanier,
1996).
Otros de los elementos que caracteriza a los Bacillus sp es la producción de
enzimas hidrolíticas que ayudan a mejorar la utilización de los alimentos. Dentro
de estas se encuentran las proteasas, amilasas y las glicosidasas que
descomponen las complejas moléculas de los alimentos y las transforman en
nutrientes más simples. Estos compuestos son absorbidos más rápidamente por
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el animal o pueden ser empleados por otras bacterias beneficiosas para el
establecimiento de una microflora intestinal balanceada. El empleo de las
bacterias del género Bacillus y sus endosporas también viene dado por su
capacidad de producción de enzimas, estas además de mejorar la digestión en el
hospedero, son capaces de inhibir el crecimiento microbiano de bacterias dañinas.
Las endosporas, por su parte, estimulan el sistema inmune contribuyendo a la
resistencia contra el desafió de patógenos ambientales. Anon (1998).
Bortolozo (2002) informa que dentro de los Bacillus mas utilizados como
probióticos se encuentra el Bacillus subtilis, a pesar de estar considerados como
microorganismo transitorio del TGI, pues no poseen la capacidad de adherirse al
epitelio intestinal, su efecto esta encaminado a multiplicar y favorecer la
colonización de otros microorganismos como es el caso del Lactobaillus
acidophylus..
Gabriel (1999) atribuye que una de las funciones más importante de los Bacillus y
sus endosporas es el fortalecimiento del sistema inmune en las aves. Los mismos
pueden actuar en la inmunología específica y en la protección inespecífica de las
parvadas. Piad (2002) también plantea que una de las acciones fundamentales de
los probióticos a base de Bacillus y sus endosporas es activando el sistema
inmune en las aves.
Efectos beneficiosos del uso de los Bacillus y sus endosporas como
probióticos en aves.
Según Ross Tech (1999) las esporas de Bacillus unidas a otras especies de
bacterias tales como Lactobacillus, Bifidobacterium y Estreptococcus, contribuyen
a disminuir la acidez del intestino, favoreciendo los procesos digestivos y el control
del crecimiento de Enterobacteriaceae en aves.
Dentro de la actividad enzimática específica de algunas especies de Bacillus se
citan:
Se produce proteasa, amilasa, β-glucanasa y otras enzimas por Bacillus subtilis,
produce proteasa, amilasa y otras enzimas el Bacillus licheniformis y produce β-
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glucanasa la especie de Bacillus circulans.
El empleo de endosporas de Bacillus sp puede contribuir a una disminución de
acidez del intestino en las aves, favoreciendo el crecimiento de Lactobacillus en el
TGI, estimulando el sistema inmune, contribuyendo a la resistencia contra el
desafío de patógenos ambientales, Inhibiendo y controlando el crecimiento
microbiano de bacterias dañinas y favorecen los procesos digestivos del (Anon,
1998).
Las endosporas de Bacillus subtilis que generalemente, permanecen viables en el
alimento suministrado a aves son estables en la acidez gástrica, actúan contra
patógenos específicos en el intestino e incrementan los Lactobacillus del tubo
intestinal (Jiraphocakul et al, 1990).

bibliografia
www.bibliociencias.cu/gsdl/collect/libros/index/assoc/.../doc.pdf - Similares
http://www.fondef.cl/documentos/iberoeka/ALIMENTOS/CYLLENE.pdf

Proyectos en Marcha: Probióticos para Alimentación Humana y Animal
Características fundamentales de un probiótico:
Ser bioseguro (GRAS)
Estar vivo al ingerirlo
Ser estable hasta el momento de su consumo
Beneficiar la salud del consumidor

Probióticos para Alimentación Humana y Animal
El grupo investigador está dirigido por el Dr. Roberto Grau, de la Universidad nacional
de Rosario (CONICET) quien trabaja hace 15 años con bacterias esporuladoras, y es
reconocido internacionalmente como referente del área.
Oportunidad en Alimentación Animal
A partir de enero de 2006 se ha puesto en vigencia en la Unión Europea la prohibición del
uso de los antibióticos como promotores de crecimiento para alimentación animal.
Existe una creciente demanda internacional de carnes de origen avícola, porcina, bovina y
de pescados.
En los países productores de granos hay una fuerte tendencia al agregado de valor por la
vía de la transformación de proteínas vegetales en proteínas animales.
El aumento relativo del costo de las materias primas, principalmente maíz y soja,
incentiva la búsqueda de alternativas para aumentar la eficiencia en la conversión de
alimentos en la cría de pollos, cerdos y vacas. Los probióticos tienen el potencial de
aumentar los volúmenes de producción y reducir los costos dado que son promotores de
crecimiento y aumentan las tasas de conversión de alimento.
Adicionalmente, se observa un constante aumento en el gasto de salud y nutrición de
animales de compañía
Modelos Animales de Estudio
Ratas Wistar Pollos línea COP

MARCO TEORICO.

Antecedentes Internacionales.
En la universidad de San Carlos Guatemala se estudio alternativas de manejo, que sean sustentables y permitan hacer uso eficiente de los recursos disponibles a fin de ofrecer productos de buena calidad, que puedan competir económicamente dentro y fuera del Guatemala.

Los avances registrados en Biotecnología están aportando nuevos medios
para aumentar la eficiencia en la producción de leche y mejorar el bienestar de
los animales. Estos avances han incluido el uso de hongos, bacterias vivas y
levaduras que facilitan la digestión y asimilación de los nutrientes ofrecidos en
la dieta, en este caso se utilizo la Bacillus subtilis.

Estudios realizados con levaduras han mostrado resultados satisfactorios, así como en el caso del Bacillus subtilis, que esta siendo utilizado en otros países obteniéndose aumentos en la producción de leche ya que promueve la absorción de proteínas y ácidos grasos de cadena corta (propionato, butirato y acetato).

En Chile también se han implementado algunos estudios para tratar de relacionar lo que es la Bacillus subtilis con la alimentación animal, para conformarlos en un producto ya elaborado.

El atractivo de la Bacilus subtilis desde un punto de vista industrial es que pueden permanecer en estado latente, manteniendo sus cualidades durante distintos procesos productivos (secado en spray, pelletizado y otros). No necesitan cadena de frío, y tienen, como producto, tiempos de vida útil muy largos.

El proyecto que se realizo es Chile nace a partir de investigaciones sobre la capacidad probiótica de cepas de Bacillus subtilis para que pueda ser utilizada, en una primer etapa, como:
-Promotor de crecimiento natural (aves y cerdos; peces)
-Promotor de destete (terneros y cerdos)
-Estimulador del sistema inmune y regulador intestinal (en mascotas)

La investigación se realizo con una cepa seleccionada de Bacillus subtilis que fue posteriormente modificada por ingeniería genética, incrementando significativamente sus propiedades probióticas.


Antecedentes Nacionales.

En Colombia se a trabajado con la Bacillus subtilis en la alimentación pisicola en donde se ha hecho la evaluación de probióticos en acuicultura se ha abordado el concepto de “probiótico” y su eficacia sigue siendo poca conocido y siguen existiendo dudas sobre la eficiencia y seguridad de los organismos probióticos que pueden tener origen en una multiplicidad de factores tales como el uso de aislados con poca actividad, en que los productos comerciales han generado expectativas poco realistas por parte de los consumidores, además porque relativamente pocos estudios han abordado los mecanismos de acción de la cepas probióticas seleccionadas utilizando condiciones estandarizadas.

bacillus claussialimentacion animal pdf

Aqui podemos observar algunos enlaces relacionados con el tema:


http://www.mouriscade.com/doc_ponencias/oct-2006/ultimos_avances_de_aditivos_rumiantes.pdf

http://www.fondef.cl/documentos/iberoeka/ALIMENTOS/CYLLENE.pdf

http://biblioteca.usac.edu.gt/tesis/10/10_1128.pdf
http://www.ots.ac.cr/tropiweb/attachments/volumes/vol52-4/15GUNTHER%20efe.pdf

Aislamiento de bacilos esporulados con actividad probiotica para la alimentación animal

1Generalidades
1.1Titulo Preliminar
Aislamiento de bacilos esporulados con actividad probiotica para la alimentación animal

1.2Problema
1.2.1 Planteamiento del problema
Anteriormente los bacillus esporulados eran considerados como microorganismos patógenos, debido a esto, su implementación en la industria era prácticamente  imposible. Posteriormente se descubrió que  los bacillus esporulados tienen algunas propiedades altamente beneficiosas para los animales en términos de probioticos.

1.2.2 Formulación
¿Son los bacilos esporulados causantes de infecciones en animales, o por el contrario, forman parte de la microbiota benéfica de estos?

1.2.3 Preguntas auxiliares                   
¿Qué son microorganismos con actividad probiotica?

¿Qué clases de bacilos tienen actividad probiotica?

¿Dónde se pueden encontrar los bacilos esporulados?
1.3 Justificación
Este trabajo se va realizar con el fin de evaluar el potencial probiotico (que se define como cultivo de microorganismos vivos que colonizan el tracto digestivo de los animales que los consumen) que tienen los bacillus esporulados, para ver si se pueden adicionar al concentrado o al alimento para las gallinas, para que estas sean más eficientes en la conversión del alimento, en la absorción de nutrientes, y tengan un equilibrio entre las bacterias beneficiosas y peligrosas del aparato digestivo y así poder rebajar los costos de producción de estas y rebajar los índices de enfermedades.
Este trabajo es importante porque los bacillus eran considerados como unas bacterias nocivas para la salud, sobre estos se han echo muy pocas investigaciones pero hace unos años se han viene haciendo pruebas y se observa que no todos son nocivos, que por el contrario existen unos que son beneficiosos y se pueden usar o proveer al alimento de los animales, para que estos sean mas eficientes productivamente.
Se realizara también porque en Colombia no existen empresas destinadas al cultivo de bacterias con fines productivos para la industria pecuaria, sino que todas la bacterias de este tipo son importadas, por esta razón las empresas productoras no las utilizan mucho, porque importarlas directamente o comprarlas a las empresas importadoras es muy costoso y no es 100% seguro que estas les sirvan a los animales porque son aisladas de animales que de pronto no están en las mismas condiciones ambientales, ni alimentarias a las que están sometidas los animales de acá, por este motivo puede que las bacterias no funcionen o que no sean de mucho aprovechamiento, como lo sería en el país originario. Por eso queremos aislar, reproducir y evaluar, estos bacillus con el fin de poder brindar un servicio a las empresas productoras, para rebajarles costos y que el servicio de sea más eficaz.



1.4 Objetivos

1.4.1 General
Evaluar la actividad probiotica de los bacilos esporulados de excretas animales.

1.4.2 Específicos
1. Aislar los bacillus esporludados de las excretas de pollo.
2. Determinar el potencial probiotico del bacillus aislado empleado posteriormente para la alimentación.


1.5 Asesor temático y metodológico

Luz Adriana Gutiérrez R



1.6 Cronograma

Semana/fecha
Descripción actividades
Responsable
Observaciones
1-Agosto 3
Ideas del proyecto
Juan David Trujillo
Camilo Soto
Asesoría del trabajo
2-Agosto 10
Revisión del proyecto
Juan David Trujillo
Camilo Soto
Asesoría con la profesora Luz Adriana Gutiérrez
3-  Agosto 17
Revisión del proyecto
Juan David Trujillo
Camilo Soto
Asesoría con la profesora Luz Adriana Gutiérrez
4- Agosto 27
Primera entrega del anteproyecto
Juan David Trujillo
Camilo Soto




1.7 Presupuesto

Detalle
Valor unitario
Cantidad
Total
Alimentación
5.000
10
50.000
Fotocopias
60
30
1.800
Laboratorio
10.000
1
10.000
Excretas de pollos recién nacidos
2.000
200gr
2.000
Reactivos para pruebas en laboratorio
10.000
2
20.000
Hora de trabajo
20.000
4
80.000
Gasolina
50.000
1
50.000
Subtotal


168.800
Imprevistos (15%)


25.320
TOTAL


194.120




1.8 Marco referencial inicial
Los Bacillus es un género de bacterias en forma de bastón y Gram positivas. El género Bacillus pertenece a la División Firmicutes. Son aerobios estrictos o anaerobios facultativos. En condiciones estresantes forman una endoespora de situación central, que deforma la estructura de la célula. Dicha forma esporulada es resistente a las altas temperaturas y a los desinfectantes químicos corrientes.
La mayoría de especies dan positivo a la prueba de la catalasa y son saprófitas. Viven en el suelo, agua del mar y ríos.
Algunas de las especies con características benéficas son:
·         Bacillus subtilis: Hasta el año 2008 era considerado productor de enfermedades de transmisión alimentaria por producir exotoxinas; pero posteriormente se descubrió que tenia propiedades como fungicida, además se podía fijar a nivel del intestino de diferentes especies para generar antagonismos con agentes patógenos. Otra ventaja del bacillus subtilis es que tiene la capacidad de producir enzimas, tales como proteasas, amilasas y pectinasas
·         Bacillus Stearotermophilus: Se usa como indicador biológico de eficacia de la aplicación de la autoclave
·         Bacillus Pumilus: Puede emplearse como indicador de la luz ultra violeta
·         Bacillus Licheniformis: Capaz de producir proteasas para detergentes biológicos
·         Bacillus Clausii: Produce inhibición en la adherencia de bacterias patógenas, igualmente produce sustancias antimicrobianas. Este tipo de bacilo es resistente a diversos antibióticos.
1.9 Bibliografía


*http://www.worldgastroenterology.org/assets/downloads/es/pdf/guidelines/19_probioticos_prebioticos_es.pdf

http://plm.wyeth.com.mx/centroamerica/prods/40082.htm



Metodología fotográfica

medio enriquecido con levadura




Prueba  de Mac farland